Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
сделать стартовой добавить в избранное
Кефирный гриб на сайте za4eti.ru

Биология Биология

Клонирование и анализ генов легких цепей иммуноглобулинов стерляди

Фонарь желаний бумажный, оранжевый.
В комплекте: фонарик, горелка. Оформление упаковки - 100% полностью на русском языке. Форма купола "перевёрнутая груша" как у
87 руб
Раздел: Небесные фонарики
Ручка "Шприц", желтая.
Необычная ручка в виде шприца. Состоит из пластикового корпуса с нанесением мерной шкалы. Внутри находится жидкость желтого цвета,
31 руб
Раздел: Оригинальные ручки
Совок №5.
Длина совка: 22 см. Цвет в ассортименте, без возможности выбора.
18 руб
Раздел: Совки

ОГЛАВЛЕНИЕСПИСОК .5 СТРОЕНИЕ .5 ГЕНОМНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ И ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ L-ЦЕПЕЙ ИГ У .7 ГЕНОМНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ И ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ L-ЦЕПЕЙ ИГ У НИЗШИХ ЭВОЛЮЦИЯ ГЕНОВ L-ЦЕПЕЙ .19МАТЕРИАЛЫ И .24 ЭЛЕКТРОФОРЕЗ .24 ВЫДЕЛЕНИЕ ДНК ИЗ .24 ПОЛУЧЕНИЕ РАДИОАКТИВНЫХ 25 ВЫДЕЛЕНИЕ ПЛАЗМИДНОЙ .26 ОЧИСТКА ПЛАЗМИДНОЙ ДНК МЕТОДОМ РАВНОВЕСНОГО ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЯ В ГРАДИЕНТЕ ПЛОТНОСТИ CsCl.26 ТРАНСФОРМАЦИЯ ПРОКАРИОТИЧЕСКИХ ВЫДЕЛЕНИЕ ЛЕЙКОЦИТОВ ИЗ КРОВИ ВЫДЕЛЕНИЕ СУММАРНОЙ РНК ИЗ ВЫДЕЛЕНИЕ ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНОЙ ДНК ИЗ ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ .28 КОНСТРУИРОВАНИЕ БИБЛИОТЕКИ ЦЕПНАЯ .33 СУБКЛОНИРОВАНИЕ .34 СКРИНИНГ БИБЛИОТЕКИ .34 ОПРЕДЕЛЕНИЕ НУКЛЕОТИДНОЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ДНК.35 САУЗЕРН БЛОТ КОНСТРУИРОВАНИЕ БИБЛИОТЕКИ кДНК И ЕЕ СКРИНИНГ.38 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПЕРВИЧНОЙ .40 СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПЕРВИЧНОЙ АНАЛИЗ ГЕНОМНОЙ .49 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ИГ иммуноглобулины пн пар нуклеотидов тпн тысяч пар нуклеотидов е.а. единица активности ИПТГ изопропилтиогалактозид ТЕМЕД , , ,' '-тетраметил-этилен- диамин трис трис(гидроксиметил)аминометан дН Ф дезоксиаденозинтрифосфат ддНТФ дидезоксинеклеотидтрифосфат дНТФ дезоксинуклеотидтрифосфат рA Ф рибоаденозинтрифосфат ДТТ дитиотрейтол a2ЭДТА этилендиаминтетраацетат натрия SDS додецилсульфат натрия X-Gal 5-бромо-4-хлоро-3-индолил-бета-D- галактозид ВВЕДЕНИЕ В основе функционирования гуморального иммунитета у млекопитающих лежит сложный комплекс молекулярно-генетических и физиологических механизмов, обеспечивающих реорганизацию, мутагенез и клональную экспрессию генов иммуноглобулинов. Возникновение этой подсистемы иммунитета связывают с появлением хрящевых рыб. На ранних этапах эволюции гены ИГ были организованы в виде повторяющихся кластеров V-J-C генных сегментов. При подобной организации разнообразие продуцируемых антител основывалось, прежде всего, на количестве имевшихся в геноме кластеров, каждый из которых кодировал один вариант полипептидных субъединиц ИГ. В ходе дальнейшей эволюции произошел переход от кластерной к сегментарной организации, обеспечивающей дополнительный источник разнообразия за счет комбинативной рекомбинации генных сегментов. Предполагается, что этот переход также имел важное значение для регуляции экспрессии генов и осуществления механизмов клонального отбора антителопродуцирующих клеток в ходе иммунного ответа. Настоящая работа представляет собой часть проекта, направленного на изучение эволюции механизмов изотипического исключения генов легких цепей ИГ у низших позвоночных. Целями работы являлись изучение структуры и организации генов легких цепей ИГ стерляди (Acipe ser ru he us), представителя филогенетически древней группы костно-хрящевых рыб. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ СТРОЕНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ Иммуноглобулины выполняют в организме позвоночных функцию гуморальных антител и антиген-связывающих рецепторов В-лимфоцитов. Особенностью этого класса белков является огромное разнообразие, позволяющее им вступать во взаимодействие с фактически любыми биологическими макромолекулами. Типичная молекула ИГ состоит из двух идентичных тяжелых (H) и двух идентичных легких (L) полипептидных цепей. H- и L-цепи построены из нескольких доменов, каждый из которых состоит примерно из 110 аминокислотных остатков.

У млекопитающих существует пять классов H-цепей: (, m, (, (, и (. Каждая H-цепь построена из одного -концевого и нескольких (трех или четырех) C-концевых доменов. -концевые домены различаются в разных молекулах и называются вариабельными (V) доменами. C-концевые домены имеют одинаковую структуру у молекул одного класса и называются константными (С) доменами (рис. 1) (Пол, 1987). Среди L-цепей млекопитающих различают два типа: лямбда и каппа. Каждая L-цепь состоит из одного вариабельного и одного константного доменов. В индивидуальной молекуле ИГ присутствует только один тип L-цепи (Roi e al., 1993). Гигантское разнообразие ИГ обеспечивается прежде всего тем, что V и C области кодируются разными генами (генными сегментами), физически разнесенными в зародышевой ДНК. В формировании вариабельных доменов H-цепей участвуют три генных сегмента: вариабельный (V), D-сегмент (от англ. diversi y- разнообразие) и J-сегмент (от англ. joi i g- соединяющий). С-области Н-цепей разных классов кодируются отдельными генами (Roi e al., 1993). Рис. 1. Схема строения молекулы иммуноглобулина. Типичная молекула иммуноглобулина содержит две идентичные легкие (L) и две идентичные тяжелые (H) цепи, связанные между собой ковалентно дисульфидными связями. Каждая L-цепь состоит из одного вариабельного (VL) и одного константного (СL) домена. Н-цепь состоит из одного VH и нескольких CН доменов. В формировании зрелого гена L-цепи участвуют три генных сегмента: V- сегмент и J-сегмент кодируют V-домен, C-сегмент кодирует константный домен. На поздних стадиях развития В-лимфоцита генные сегменты, кодирующие вариабельные домены, объединяются в различных сочетаниях, образуя матрицу для экспрессии L- и H-цепей (Seidma e al., 1979; Durdik e al., 1984). ГЕНОМНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ И ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ L-ЦЕПЕЙ ИГ У МЛЕКОПИТАЮЩИХ Различные виды млекопитающих имеют сходную схему организации и экспрессии генов ИГ. Одним из наиболее изученных в этом отношении видов является человек. Лямбда и каппа цепи ИГ у человека кодируются генами, расположеными в разных локусах и на разных хромосомах. Каппа локус состоит из большого количества V( генных сегментов, собраных в группы, пяти J( и одного С( сегмента. Такой тип организации называется сегментарным (рис. 2). Лямбда локус состоит из группы V( сегментов, точное количество которых неизвестно, и семи пар J(-C( сегментов. Три из них (JC(4 - JC(6) являются псевдогенами (Hie er e al., 1981; Roi e al., 1993). В процессе развития В-лимфоцита в кроветворных органах один из V сегментов соединяется с одним из J сегментов посредством сайтспецифической рекомбинации (Scha z e al., 1992). В этот процесс вовлекаются специальные олигомерные последовательности: гепта- и нонамеры, фланкирующие с 3' стороны V сегмент и с 5' стороны J сегмент (рис. 3) (Aguilera e al., 1987; Hesse e al., 1989). Отличительной особенностью лямбда и каппа локусов является конфигурация промежутков между гепта- и нонамерами, называемых спейсерами. С V и J генными сегментами лямбда типа ассоциированы 23 пн и 12 пн спейсеры соответственно, а с V и J сегментами каппа типа - 12 пн и 23 пн спейсеры (Durdik e al.,

1984; S av ezer e al., 1985).л Рис. 2. Схема строения лямбда и каппа локусов генов L-цепей ИГ человека. Лямбда локус содержит много V( сегментов и семь пар близкорасположенных J(-C(. Три из них яляюся псевдогенами ((). Каппа локус содержит много V( пять J( и один C( генный сегмент (Hie er e al., 1981; Roi e al., 1993). Обозначения: - сигнальные олигомеры. Рис. 3. Схема расположения олигонуклеотидных последовательностей, задействованных в сайтспецифической рекомбинации в каппа локусе млекопитающих. Эти последовательности фланкируют с 3‘ стороны VL сегмент и с 5’ стороны JL сегмент. Во время рекомбинации гептамер и нонамер одного из VL сегмента объединяются с гептамером и нонамером одного из JL сегмента. Это делает возможным соединение VL и JL сегментов без нарушения рамки трансляции (Aguilera e al., 1987; Hesse e al., 1989). Обозначения: - сигнальные олигомеры. Последовательность, в которой рекомбинируют локусы L-цепей, строго упорядочена во времени. Показано, что первыми перестраиваются локусы каппа типа, причем если в одной хромосоме перестройка оказалась нефункциональной, тоесть не привела к появлению полноценного гена, то рекомбинация происходит в каппа локусе на гомологичной хромосоме. В случае повторной абортивной перестройки аналогично происходят перестройки в лямбда локусах. Если в клетке непродуктивно перестроились все четыре локуса, то она превращатся в 0-клетку и подвергается апоптозу. Если же перестройка одного из локусов привела к образованию функционального гена, то рекомбинация остальных локусов блокируется. Детали механизма блокирования неизвестны, однако установлено, что необходимым условием для него является транскрипция продуктивно перестроенного гена. В результате в каждом индивидуальном лимфоците синтезируется только один тип L-цепей, каппа или лямбда, и экспрессия гена происходит только на одной из двух гомологичных хромосом. Эти феномены, называемые изотипическим и аллельным исключениями лежат в основе ключевого принципа функционирования иммунной системы - принципа клональной селекции (Пол, 1987; S rob, 1987). В организме млекопитающих генерируется свыше десяти миллионов вариантов антител, хотя в геноме содержится значительно меньшее количество генных сегментов, которые могут участвовать в формировании вариабельных доменов. В случае L-цепей, основным источником разнообразия является комбинативное сочетание V и J сегментов. Дополнительным источником является смещение рекомбинационной рамки в месте их соединения. Кроме того, V генные сегменты могут обмениваться участками ДНК с псевдогенами посредством генной конверсии. Очень существенный вклад в разнообразие специфичностей антител вносит соматическое мутирование вариабельных генных сегментов в сайтах, участвующих в формировании антигенсвязывающего центра. Соматическое разнообразие генерируется при вторичном иммунном ответе путем включения гипермутационного механизма в клетках памяти в зародышевых центрах лимфатических узлов ( o egawa 1983; Roi e al., 1993). ГЕНОМНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ И ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ L-ЦЕПЕЙ ИГ У НИЗШИХ ПОЗВОНОЧНЫХ Хрящевые рыбы. Гуморальный иммунный ответ в виде специфических антител обнаруживается только у позвоночных.

Иными словами, биочип это новое изделие, которое выступает в роли биологического эквивалента микрочипа компьютера, за исключением того, что, вместо выполнения миллионов математических действий, использующих электричество, здесь происходит расшифровка работы тысяч генов за счет процесса гибридизации. В настоящее время исследования генной экспрессии часто проводятся с использованием высокоэффективных микрочипов ряда фирм. У фирмы Affymetrix они представляют собой маленькие пластинки, в микролунки которых нанесены короткие (2025 нуклеотидов) пробы, комплементарные последовательностям исследуемых генов. При этом каждому гену соответствует несколько (1020) таких проб. Это существенно повышает точность и воспроизводимость количественного анализа генной экспрессии. Плотность размещения проб, а следовательно количество генов, анализируемых на одном чипе, могут быть столь велики, что один такой чип способен охватить все гены человека. С таким микрочипом проводят гибридизацию меченых копий суммарной РНК клетки (кДНК). Благодаря комплементарности цепей, в каждой лунке гибридизуется отдельная фракция кДНК

1. Возрастные изменения ассоциативных связей (на материале полей «простой», «легкий», «трудный», «тяжелый», «сложный»)

2. Новые и сверхновые звезды (Доклад)

3. Обитатели подводного мира (Доклад)

4. Факторы вызывающие мутацию (Доклад)

5. Правила приема в военно-учебные заведения (Доклад)

6. Народы Украины, Молдовы, Белоруссии (Доклад)
7. Газовая промышленность (Доклад)
8. Италия: географические особенности и экономика (Доклад)

9. Народы Европейской части РФ (Доклад)

10. Реки России (Доклад)

11. Сельское хозяйство в Индии и Китае (Доклад)

12. Таиланд (Доклад)

13. Чили (Доклад)

14. Зарубежный опыт государственного регулирования рыночной экономики на примере Франции (Доклад)

15. Мусульманское право (Доклад)

16. Доклад: Страны мира во второй половине XX века. Франция.

Перчатки Paclan, латексные, 100 штук, размер М.
Основная составляющая перчаток – натуральный латекс. Высокие барьерные качества. Высокие тактильные качества. Можно использовать для мытья
433 руб
Раздел: Перчатки
Ведро-контейнер для мусора, 50 литров, серое, качающаяся крышка.
Объем: 50 литров. Размер: 74х40х35 см. Материал: пластик.
1124 руб
Раздел: Корзины для бумаг, мусора
Автокресло Еду-Еду "KS-513 Lux" с вкладышем (цвет: оранжевый, 9-36 кг).
Автокресло разработано для детей весом от 9 до 36 кг. Группа веса 1/2/3 (ECE R44/04). Каждая деталь автокресла спроектирована должным
2977 руб
Раздел: Группа 1/2/3 (9-36 кг)

17. Типы государства (Доклад)

18. Александр Трифонович Твардовский (Доклад)

19. Устные высказывания и их особенности (беседа, лекция, доклад, диспут, дискуссия)

20. Биография Джеральда Даррелла (Доклад)

21. Иван Сергеевич Тургенев. Жизнь и творчество (Доклад)

22. Национально-освободительная война сирийского и ливанских народов в 1919-1927 гг. (Доклад)
23. Ярлыки ордынских ханов русским митрополитам (Доклад)
24. Кибернетика (Доклад)

25. Переходные процессы в линейных цепях

26. Комплексные числа и действия с ними (Доклад)

27. Очаговый турбекулез легких

28. Клиника и лечение трихомониаза у мужчин (Доклад)

29. Все об антителах (иммуноглобулинах)

30. Рак легкого

31. Железодефицитная анемия тяжелой степени (история болезни)

32. Бронхиты. Бронхоэктазии. Бронхиальная астма. Эмфизема легких

Мягкая игрушка "Волк. Забивака", 24 см.
Этот обаятельный, улыбчивый символ Чемпионата мира по футболу ещё и сувенир в память о событии мирового масштаба на всю жизнь! Уже
1280 руб
Раздел: Игрушки, фигурки
Портмоне для CD/DVD "Brauberg", на 96 дисков.
Вмещает 96 CD/DVD дисков. Цвета - ассорти (синий, черный, красный, серый). Тканевая окантовка. Застежка - молния. Обложка - пластик. Цвет
487 руб
Раздел: Боксы, сумки для CD, DVD
Шахматы обиходные, деревянные с доской.
Шахматы - настольная логическая игра со специальными фигурами на 64-клеточной доске для двух соперников, сочетающая в себе
660 руб
Раздел: Шахматы

33. Бронхоэктатическая болезнь. Эмпиема плевры. Абсцессы легких. Экссудативные плевриты

34. Дознание. Его виды (Доклад)

35. Охрана природы (Доклад)

36. Обучение в Германии (Доклад)

37. Коррекционная работа по совершенствованию грамматического строя речи учеников 7-х классов школы для детей с тяжелыми нарушениями речи.

38. Процесс становление власти в России (Доклад)
39. Ангола после обретения независимости (Доклад)
40. Гана до обретения независимости (Доклад)

41. Гражданское общество и либерализм (Доклад)

42. Легкая промышленность Украины

43. Механизмы Высокотемпературного Радационного Охрупчивания (Доклад)

44. Расчет различных электрических цепей

45. Расчет линейных цепей методом топологических графов

46. Радиотехнические цепи и сигналы

47. Нелинейные электрические цепи

48. Расчет корректирующих цепей широкополосных усилительных каскадов на полевых транзисторах

Магнитная доска для фото, с маркером, 30x48 см.
Классический вариант магнитной доски найдет свое место в любом доме. Подойдет для игр и обучения, для крепления заметок и для надписей.
447 руб
Раздел: Прочие
Мультиплеер "Антошка".
Супермодный плеер для малышей "Антошка" в оригинальном дизайне! В нем собрано 15 популярных песенок и 5 любимых сказок. Бонус!
344 руб
Раздел: Смартфоны, мультиплееры
Ниблер силиконовый "Зайчик", голубой.
Каждая мама знает, насколько важный этап в жизни младенца представляет собой прикорм. Но как же проблематично скормить хотя бы ложечку
373 руб
Раздел: Ниблеры

49. Теория электрических цепей

50. 6 задач по теории электрических цепей

51. Расчет переходных процессов в линейных цепях с сосредоточенными параметрами

52. Богоматерь Донская /ГТГ/ Интерпретация темы Богоматери Елеусы (Доклад)

53. Социологическое исследование на тему "Вредные привычки среди молодежи" (Доклад)

54. Концепции "Я" у Ч.Кули и Дж.Мида (Доклад)
55. Этническая специфика (Доклад)
56. Устройство глаза человека (Доклад) (WinWord 98)

57. О вреде курения и алкоголизма (Доклад)

58. Что такое лечебное голодание (Доклад)

59. История легкой атлетики

60. Легкая атлетика

61. Физиогномика (отрывок из работ Аристотеля) ([Доклад])

62. Философия, религия и наука и их соотношения в философском знании (Доклад)

63. Роберт Оуэн - социалист-утопист (Доклад)

64. Зарождение философской традиции (Доклад)

Настольная игра "Loonacy".
Loonacy (Лунаси) – очень забавная и веселая игра, в которой победит тот, что проворнее и внимательнее. Суть игры заключается в том, чтобы
490 руб
Раздел: Карточные игры
Горшок дорожный и насадка на унитаз "HandyPotty", голубой.
Складной дорожный горшок HandyPotty. Он может заменить сразу три аксессуара: привычный ребенку и его родителям горшок, дорожный горшок для
1160 руб
Раздел: Прочие
Шкатулка музыкальная "Сердце", 16x15x7 см, арт. 24806.
Состав: пластик, элементы металла, стекло. Регулярно удалять пыль сухой, мягкой тканью. Музыкальный механизм с ручным заводом. Товар не
775 руб
Раздел: Шкатулки музыкальные

65. Крахмал (Доклад)

66. Мембранное равновесие Доннана (Доклад)

67. Банковская система СССР (Доклад)

68. Кредитные ресурсы коммерческого банка (Доклад)

69. Инвестиционные банки (Доклад)

70. Товарная биржа (Доклад)
71. Безналичные расчеты (Доклад)
72. Типы экономических кризисов: "Длинные волны Кондратьева" (Доклад)

73. Адам Смит (Доклад)

74. Введение в маркетинг (Доклад)

75. Информационная сущность рекламы (Доклад)

76. Аукционные торги (Доклад)

77. Предпосылки создания и будущее новой европейской валюты - евро (Доклад)

78. "Мягкие" составляющие конкурентоспособности (Доклад)

79. Структура управления организацией, ориентированная на решение стратегических проблем (Доклад)

80. Перекрестная эластичность спроса и его эластичность по доходу (Доклад)

Ваза декоративная "Цветочный каприз", 10x10x24,5 см.
Ваза декоративная. Размер: 10x10x24,5 см. Материал: керамика.
311 руб
Раздел: Вазы
Ручка гелевая "BLGP-G1-5", синяя, 0,3 мм, 3 штуки.
Гелевая ручка Pilot имеет пластиковый корпус с резиновой манжеткой, которая снижает напряжение руки. Стержень с чернилами синего цвета в
345 руб
Раздел: Синие
Каталка детская "Mercedes-Benz SLS AMG С197" (белая).
Каталка "Mercedes-Benz SLS AMG С197" - это легкая пластиковая каталка для детей от года. Она может использоваться как дома, так
2590 руб
Раздел: Каталки

81. Издержки производства и их виды (Доклад)

82. Общества с ограниченной ответственностью (Доклад)

83. Вексель в хозяйственном обороте (Доклад)

84. Ценные бумаги (Доклад)

85. Деньги и их роль в экономике (Доклад)

86. Экономическая интеграция стран СНГ (доклад)
87. Меры социальной защиты (Доклад)
88. Причины финансового кризиса в Украине (Доклад)

89. Легкая пехота Наполеона

90. Миф и религия (Доклад)

91. Эпитафия ускользающей красоте по рассказу И. А. Бунина «Легкое дыхание»

92. Эпитафия ускользающей красоте (по рассказу «Легкое дыхание»)

93. Сообщение-доклад по произведению И.С. Тургенева "Накануне"

94. Марковские цепи

95. Сердечная астма (СА) и отек легких (ОЛ)

96. Диссеминированный туберкулез легких

Набор детской складной мебели Ника "Азбука" (КУ1).
Комплект складной. Подходит для кормления, игр и обучения. Поверхность столешницы ламинированная с нанесением ярких познавательных
1467 руб
Раздел: Наборы детской мебели
Жидкое средство для стирки детских вещей "Meine Liebe", 800 мл.
Концентрат абсолютно безопасен для здоровья. Не содержит хлора, фосфатов, ароматизаторов, красителей и других химически агрессивных
320 руб
Раздел: Для стирки детских вещей
Датчик утечки газа "Страж".
очевидной пользы, бытовой газ несет страшную опасность: риск отравления или даже взрыва. Датчик утечки газа «Страж» обезопасит Ваш дом от
610 руб
Раздел: Детекторы, датчики движения

97. Острый абсцесс и гангрена легких

98. Доброкачественные опухоли и эхинококкоз легких

99. История болезни - Онкология (периферический рак левого легкого)


Поиск Рефератов на сайте za4eti.ru Вы студент, и у Вас нет времени на выполнение письменных работ (рефератов, курсовых и дипломов)? Мы сможем Вам в этом помочь. Возможно, Вам подойдет что-то из ПЕРЕЧНЯ ПРЕДМЕТОВ И ДИСЦИПЛИН, ПО КОТОРЫМ ВЫПОЛНЯЮТСЯ РЕФЕРАТЫ, КУРСОВЫЕ И ДИПЛОМНЫЕ РАБОТЫ. 
Вы можете поискать нужную Вам работу в КОЛЛЕКЦИИ ГОТОВЫХ РЕФЕРАТОВ, КУРСОВЫХ И ДИПЛОМНЫХ РАБОТ, выполненных преподавателями московских ВУЗов за период более чем 10-летней работы. Эти работы Вы можете бесплатно СКАЧАТЬ.