Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
сделать стартовой добавить в избранное
Кефирный гриб на сайте za4eti.ru

Биология Биология

Секвенирование (Генная инженерия)

Карабин, 6x60 мм.
Размеры: 6x60 мм. Материал: металл. Упаковка: блистер.
44 руб
Раздел: Карабины для ошейников и поводков
Ручка "Помада".
Шариковая ручка в виде тюбика помады. Расцветка корпуса в ассортименте, без возможности выбора!
25 руб
Раздел: Оригинальные ручки
Крючки с поводками Mikado SSH Fudo "SB Chinu", №4BN, поводок 0,22 мм.
Качественные Японские крючки с лопаткой. Крючки с поводками – готовы к ловле. Высшего качества, исключительно острые японские крючки,
58 руб
Раздел: Размер от №1 до №10

ОГЛАВЛЕНИЕ Введение 3 1. Определение нуклеотидной последовательности модифицированным методом Максама и Гилберта .4 2. Секвенирование ДНК методом полимеразного копирования ( метод Сэнгера) 8 3. Филогенетический анализ геномов вирусов 15 4. Компьютерный анализ генетических текстов .18 Заключение .22 Список литературы .23ВВЕДЕНИЕ. Разработка методов клонирования и определения последовательнос­ти оснований (секвенирования) нуклеиновых кислот положила начало новому этапу развития молекулярной биологии. Знание первичной структуры участков генома, выполняющих определенные функции, дало возможность эффективно применить для их исследования целый арсенал новых методов генной инженерии. Эти методы (направленный мутагенез, рекомбинация i vi ro и др.) позволяют модифицировать участки нуклеотидных последовательностей и исследовать их функции на моле­кулярном уровне. С их помощью комбинируются участки генетического материала и создаются геномы с совершенно новыми функциями. Секвенирование нуклеиновых кислот в настоящее время стало ру­тинным методом молекулярной биологии. Несомненно, в ближайшем бу­дущем появятся еще более совершенные автоматические секвенаторы, что приведет к резкому увеличению числа расшифрованных последова­тельностей. Благодаря знанию генетического кода появилась возможность опре­делять участки нуклеотидных последовательностей, кодирующих потен­циальные белки. Этот источник и сегодня дает нам ос­новную информацию о функциональном строении нуклеотидной последо­вательности. 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ НУКЛЕОТИДНОЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ МОДИФИЦИРОВАННЫМ МЕТОДОМ МАКСАМА И ГИЛБЕРТА.Быстрый прогресс, наблюдавшийся в последние годы в различных областях молекулярной биологии, во многом обусловлен появлением эффективного ме­тода определения первичной структуры ДНК. Этот метод, предложенный в 1977 г. Максамом и Гилбер­том, основан на селективной химической модифика­ции различных типов гетероциклических оснований в составе ДНК с последующим расщеплением межнуклеотидных связей в модифицированных звеньях. Реакции селективной модификации по каждому типу гетероциклических оснований проводятся таким обра­зом, чтобы в каждой молекуле ДНК в среднем моди­фицировалось только одно звено данного типа. По­скольку все звенья данного типа в составе молекулы эквивалентны и реагируют с модифицирующим агентом с одинаковыми скоростями, то в сумме каждое звено этого типа окажется частично модифициро­ванным. Дальнейшая обработка ДНК вторичным амином или щелочью приводит к отщеплению моди­фицированных гетероциклических оснований от цепи ДНК и разрыву полинуклеотидной цепи в местах от­щепления гетероциклов (рис. 1). Модификации подвергают ДНК, 32Р-меченные по 5'-концевому нуклеотидному звену. Радиоактивная метка вводится фосфорилированием с помощью -32Р-АТР и Т4-полинуклеотидкиназы. Таким образом, в результате химичес­кой деградации получается набор фрагментов ДНК различной длины. Длины этих фрагментов соответст­вуют положению мономерных звеньев того типа, ко­торый подвергался модификации. Концевая радиоак­тивная метка служит точкой отсчета при определении длины продуктов химической деградации ДНК (рис.

2) Набор полученных фрагментов фракционируется электрофорезом в ПААГ, который позволяет разде­лять олиго (поли) нуклеотиды, отличающиеся по длине всего на одно мономерное звено. Последовательность нуклеотидов в ДНК читается непосредственно с ра­диоавтографа геля. Метод Максама и Гилберта, разработанный для анализа первичной структуры достаточно длинных ДНК, применим и для коротких (8 – 16 звенных) оли-годезоксирибонуклеотидов. Однако в этом случае ре­акции химической модификации проводят в более жестких условиях (увеличивая время и температуру реакции) с целью повышения степени модификации. Рисунок 1.1 Отщепление модифицированных звеньев от цепи ДНК после обработки вторичным амином или щелочью. Рисунок 2 Химическая деградация ДНК. Набор реакций, применяемых для расщепления ДНК по мономерным звеньям определенного типа достаточно велик и постоянно пополняется: по остаткам гуанина – обработка диметилсульфатом (рис. 3); по остаткам аденина и гуанина – апуринизация 50%-ной муравьиной кислотой (по Бартону); по остаткам аденина и цитозина – расщепление гетероциклических оснований под действием 1,2 н. гидроксида натрия и по остаткам тимидина и цитозина – обработка гидразином (рис. 4). В настоящее время широко используются два основных варианта секвенирования по Максаму — Гилберту. В первом из них реакции химической модификации ДНК проводят в растворе, а во вто­ром ДНК предварительно иммобилизуют на твердой фазе (напри­мер, ДЭАЭ-целлюлозе). Первый метод более традиционен, его многочисленные модификации с успехом использовались для сек­венирования фрагментов ДНК различных размеров, в том числе олигонуклеотидов. В то же время второй метод имеет ряд преи­муществ. Он менее трудоемок и занимает меньше времени, проще в освоении, позволяет обойтись минимальным набором оборудова­ния. В целом оба метода обеспечивают получение вполне приемле­мых результатов, а выбор одного из них определяется конкретными условиями лаборатории. Рисунок 3 Реакция селективного расщепления по остаткам гуанина Рисунок 4 Реакция селективного расщепления по остаткам тимидина и цитозина.2. СЕКВЕНИРОВАНИЕ ДНК МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОГО КОПИРОВАНИЯ. (МЕТОД СЭНГЕРА) Ферментативный синтез олиго(поли)дезоксирибонуклеотидов с по­мощью ДНК-полимераз, заключающийся в копировании матричного по­линуклеотида нашел блестящее применение в каче­стве одного из двух наиболее эффективных методов установления пер­вичной структуры ДНК. Метод состоит в по­лучении блоков-копий полидезоксирибонуклеотида, структура которого изучается. При этом обязательным является выполнение двух условий. Во-первых, копирование должно проводиться, начиная с определенного мономерного звена. Во-вторых, синтез копий следует осуществлять че­тыре раза, каждый раз останавливая его поочередно на каком-либо од­ном из четырех мономёрных звеньев (A, G, С или Т), иначе говоря, стремятся получить полный набор &quo ;комплементационно отраженных&quo ; копий исследуемого полинуклеотида, образование которых прекрати­лось в каждом из мест расположения одного из четырех мономерных звеньев нуклеиновой кислоты. Определение длины каждой копии позволяет установить положение данного мономерного звена в цепи исследуемого полину­клеотида.

Длина копии определяется фракционированием в полиакриламидном геле. Этот метод, таким образом, так же как и метод, осно­ванный на модификации оснований позволяет полу­чать информацию о положении определенного мономерного звена в цепи полинуклеотида прямо после фракционирования. Для получения копии исследуемого полинуклеотида в последнем выбирают точку отсчета, что достигается введением в систему фермен­тативного синтеза в качестве нуклеозидного компонента олигонуклеотида-затравки. Такой олигонуклеотид во всех копи­ях, образующихся в результате достраивания его ферментативным пу­тем, остается постоянным 5'-концевым фрагментом, т. е. является точ­кой отсчета. Копирование с помощью ДНК-полимеразы в присутствии всех четырех дезоксирибонуклеозид-5'-пирофосфатов (один из них берется 32Р-меченным) прово­дят в течение ограниченного времени. Цель этого этапа - проведение статистически ограниченного синтеза для получения всех возможных копий, начиная с затравки, достроенной на одно, два и т. д. звеньев, и включая полную копию изучаемого полинуклеотида. В идеале смесь должна включать все возможные полинуклеотиды (рис. 5), синтез которых статистически прекращается где-то в середине матричного полинуклеотида в районе A GC G матричной последовательности. На практике различные ком­поненты смеси присутствуют в разных количествах. Если такую смесь далее подвергнуть электрофорезу в полиакриламидном геле в опреде­ленных условиях, когда скорость движения пропорциональна длине цепи, на электрофореграмме обнаруживается серия полос, представляющих различные олигонуклеотиды. Такое фракционирование обычно не проводят, хотя оно может ис­пользоваться для контроля на Рисунок 5 Использование ферментативного синтеза олиго(поли)дезоксирибонуклеотидов для определения первичной структуры ДНК. завершающем этапе анализа. Инкуба­ционную смесь 32Р-меченных олигонуклеотидов различной длины в виде комплексов с матричным полинуклеотидом подвергают гель-филь­трации для удаления дезоксирибонуклеозид-5'-трифосфатов и аликвоты реакционной смеси реинкубируют с ДНК-полимеразой в различных ус­ловиях. В случае &quo ;минус-системы&quo ; реинкубацию проводят в присутствии только трех дезоксирибонуклеозид-5'-три-фосфатов. Например, в «- А-системе» отсутствует dA P и каждая копия в смеси достраивается с помощью ДНК-полимеразы до места, в котором следующим мономерным звеном должен быть остаток pdA (т.е. Т в матричном полинуклеотиде). Образующуюся смесь фракцио­нируют с помощью электрофореза и обнаруживают (ауторадиографически) ограниченное количество полос (их количество равно количеству Т в матричном полинуклеотиде). Аналогично прово­дят копирование в отсутствие других субстратов: - dG P, - dC P или - d P (- G-,- С- и - Т-системы соответственно). Все четыре ионофореза проводят в полиакриламидном геле параллельно. Полученные ауторадиограммы позволяют сразу напи­сать нуклеотидную последовательность, причем чтение цепи снизу вверх соответствует 5'3'-полярности цепи копии. Например, положение са­мого короткого олигонуклеотида (в &quo ; - Т-системе&quo ;) указывает на то, что следующий за ним по длине олигонуклеотид заканчивается на Т, т.

Наиболее реалистичным выглядело нахождене способа "перекрыть" места соединения вируса с белком на поверхности клеток. Если, например, "заткнуть" эти места другими молекулами, возможность прикрепления первого ко второму будет исключена. Перс-пективным также выглядит вакцинация людей фрагментами белка CCR-5, которые могут вызвать образование иммунной системой организма собственных антител, связывающих этот белок. Возможным представляется также использование генной инженерии, чтобы снабдить макрофаги новыми генами, чьи производные блокировали бы производство CCR-5. Изучаются и другие возможности - не только предупреждения, но и лечения да-леко зашедших заболеваний. Установлено также, что отдельные индивидуумы, гомози-готные по мутантному гену, были, тем не менее, инфицированы HIV. Это вынуждает считаться с возможностью существования особо вырулентной линии этого возбудителя. Что-ж, ничего необычного в этом нет, то же наблюдается и у возбудителей других забо-леваний. Как и во многих других случаях, по мере решения одной проблемы в медицине, возникают другие

1. Медицинская биотехнология и генная инженерия. Микробиологические основы антимикробной профилактики и терапии

2. Проблемы использования и пути развития интернет-компьютерных технологий в России

3. Работа маршрутизаторов в компьютерной сети

4. Использование компьютерных технологий в деятельности ОВД

5. Использование компьютерных технологий в деятельности милиции

6. Методика преподавания темы “Электромагнитные колебания” в средней школе с использованием компьютерных технологий
7. Компьютерные технологии в судостроении
8. Применение компьютерных технологий в бухгалтерском учете

9. Компьютерные технологии в обучении студентов (составление интерьера).

10. Психодиагностика и компьютерные технологии

11. Отношение россиян к развитию компьютерных технологий

12. Компьютерные технологии в строительстве

13. Компьютерные технологии в физической культуре, оздоровительной деятельности и образовательном процессе

14. Совершенствование учебного процесса по курсу "биомеханика" на основе применения компьютерных технологий

15. Компьютерная технология текущего планирования добычи руд на карьерах

16. Компьютерные технологии

Настольная игра "Головоноги".
Бедные головоноги! Голова — это практически все, что у них есть, и тем не менее они умудрились забыть свои имена. Что ж, придется включать
307 руб
Раздел: Карточные игры
Комплект постельного белья семейный "Самойловский текстиль. Японский сад", с наволочками 50х70.
Постельное белье "Самойловский текстиль" – отличный подарок себе и близким. Качественное, удобное и красивое постельное белье
1969 руб
Раздел: Бязь
Стакан складной (110 мл).
Компактный складной стакан легко умещается в кармане. Благодаря карабину его можно повесить на ремень, либо подвесить с внешней стороны к
360 руб
Раздел: Наборы для пикника

17. Информационные компьютерные технологии

18. Контрольная работа №1 по компьютерной подготовке ИЗО ГУУ (г. Москва)

19. Социальная работа с героиновыми наркоманами. Технология лечения и социальной реабилитации

20. Обучение иноязычной лексике учащихся средней школы при помощи компьютерных технологий

21. Инструментальные средства компьютерных технологий информационного обслуживания управленческой деятельности

22. Компьютерные технологии в управлении предприятием
23. Компьютерные технологии обработки экономической информации на основе использования систем управления базами данных
24. Развитие компьютерных технологий в прошлом и в будущем, Интернет

25. Геоинформационные технологии. Автоматизированные системы сбора и хранения и анализа информации. Основы автоматизированных систем проектно-изыскательских работ в природообустройстве

26. Анализ процессов в электрических цепях с ключевыми элементами на основе компьютерных технологий

27. Использование информационных компьютерных технологий в коррекционно-развивающем обучении детей с общим недоразвитием речи

28. Коррекция дисграфии у детей младшего школьного возраста путем компьютерных технологий

29. Применение современных компьютерных технологий при изучении химии

30. Уроки с использованием информационных компьютерных технологий

31. Опасность современных компьютерных технологий

32. Социальная работа среди безработных и технология поиска работы

Мягкая игрушка "Груффало".
Ой, мама, это груффало! Оно меня понюфало! Как этот страшный зверь сумел сюда попасть? Какие острые клыки, чудовищная пасть! Ножищи как
865 руб
Раздел: Персонажи мультфильмов, сказок
Шарики, 100 шт.
Диаметр: 8 и 6 см.
787 руб
Раздел: Шары для бассейна
Светильник "Совенок", 16,5 см.
Фигурка декоративная - светильник. Высота: 16,5 см. Материал: полимерный.
676 руб
Раздел: Необычные светильники

33. Формирование физической культуры личности курсантов высших учебных заведений МВД России с использованием компьютерных технологий

34. Дипломная работа: Выставка как PR-технология в формировании эстетических вкусов и потребностей населения

35. Новейшие методы селекции: клеточная инженерия, генная инженерия, хромосомная инженерия

36. Достижения генной инженерии и биотехнологии

37. Генная инженерия

38. Генная инженерия
39. Достижения генной инженерии и биотехнологии
40. Отрасли применения генной инженерии

41. Генная инженерия

42. Технология адаптивного компьютерного тестирования в профессиональной подготовке инженеров

43. Биомедицинская этика (этика и деонтология в работе медицинской сестры)

44. Реферат по технологии приготовления пищи "Венгерская кухня"

45. Технология механизированных работ в растениеводстве

46. Витражи Тиффани - технология работ

47. Эффективное управление учебной деятельностью с помощью компьютерных информационных технологий

48. Технология грузовых работ

Набор мисок "Mayer & Boch", 10 предметов.
Набор салатниц выполнен из качественного прочного стекла и включает в себя 5 круглых салатниц различного диаметра. Изделия сочетают в себе
358 руб
Раздел: Наборы
Автокресло Еду-Еду "KS-513 Lux" с вкладышем (цвет: голубой, 9-36 кг).
Автокресло разработано для детей весом от 9 до 36 кг. Группа веса 1/2/3 (ECE R44/04). Каждая деталь автокресла спроектирована должным
2977 руб
Раздел: Группа 1/2/3 (9-36 кг)
Корзина "Лягушонок", 45х45 см.
Предназначение: для игровых целей на открытом воздухе и в помещении. Материал: нейлон.
322 руб
Раздел: Корзины, контейнеры для игрушек

49. К вопросу о технологии создания ситуации успеха в воспитательной работе с подростками

50. Pr-технология работы страховой компании с клиентом после наступления страхового события

51. Технология социальной работы с пожилыми людьми

52. Курсовая работа по технологии швейных изделий

53. Технология грузовых работ

54. Инфокоммуникационные технологии управления и мониторинга при неотложных поисково-спасательных и аварийных работах
55. Эффективная технология работы с растущими потоками несистематизированной текстовой информации
56. Формирование кадрового резерва как одна из технологий кадровой работы в государственной службе

57. Технология социальной работы с женщинами

58. Технология выполнения основных полевых работ

59. Технология работы с документами

60. Применение новых технологий при проведении ремонтно-изоляционных работ

61. Компьютерное сопровождение технологии вышивания крестиком

62. Основы организации локальных компьютерных сетей на основе технологии Ethernet

63. Анализ технологий совершения компьютерных преступлений

64. Аутстаффинг и аутсорсинг – новые технологии работы с персоналом

Глобус Земли физический + политический, с подсветкой, 250 мм.
Глобус Земли физический + политический, с подсветкой. Диаметр: 250 мм. Расцветка подставки в ассортименте, без возможности выбора!
769 руб
Раздел: Глобусы
Авто-вентилятор с функцией обогрева.
Каждый автомобилист знает, что нередко погода на улице заставляет нас дискомфортно чувствовать себя и в салоне собственного автомобиля. В
600 руб
Раздел: Прочее
Блюдо "Пасхальное", диаметр 25 см.
Блюдо. Диаметр: 25 см. Высота: 3 см. Материал: фарфор. В ассортименте, без возможности выбора.
515 руб
Раздел: Прочее

65. Организация технологии работы магазина

66. Технологии групповой работы по принятию управленческих решений

67. Технологии социальной работы с пожилыми людьми

68. Использование технологий росписи по ткани в педагогической работе

69. Мультимедийные технологии как средство повышения эффективности обучения в школе. Методика работы на интерактивном оборудовании

70. Работа педагога – организатора по профилактике компьютерной зависимости
71. Технология социальной работы как мастерство специалиста социальной работы
72. Новые информационные технологии в практике работы фармацевтических организаций

73. Технология работы рН-метра со стеклянным электродом

74. Технологии реабилитационной работы с семьями, находящимися в социально опасном положении

75. Группы самопомощи как технология социальной работы

76. Исследование использования информационных технологий в социальной работе

77. Психологические технологии в социальной работе

78. Технологии работы с наркозависимыми

79. Технологии социально-медицинской работы с военнослужащими

80. Технологии социальной работы с женщинами

Ростомер говорящий "Теремок".
Дети так быстро растут! Следить за их ростом поможет говорящий ростомер «Теремок» от Азбукварика. Нужно только повесить его на
482 руб
Раздел: Ростомеры
Подставка для ножей, 11x22 см, лавандовый.
Размеры: 11х22 см. Материал корпуса: пластик. Внутренняя часть: полипропиленовое волокно. Цвет: лавандовый. Предназначена для безопасного
628 руб
Раздел: Подставки для ножей
Наклейка зеркальная "Бабочки", 30x40 см.
Стильные оригинальные зеркальные наклейки прекрасно дополнят интерьер вашего дома, наполнив его светом и радостью. Декорирование интерьера
351 руб
Раздел: Интерьерные наклейки

81. Технологии социальной работы с многодетной семьей

82. Технология социальной работы

83. Технология социальной работы в семье алкоголиков

84. Технология социальной работы по защите прав мигрантов

85. Понятие о технологии педагогической деятельности в сфере социальной работы

86. Технологии социальной работы с лицами, испытывающими насилие.
87. Технология и организация земляных работ
88. Технология производства строительных работ в экстремальных условиях

89. Разработка технологии работы промышленной сортировочной станции и расчёт основных ее параметров

90. Оптимизация работы предприятия ООО "Техсервис" по критерию прибыли за счет инноваций технологии и экономии ресурсов

91. Производство отделочных работ

92. Разработка основных разделов проекта производства работ

93. Кровельные работы

94. Реактивные двигатели, устройство, принцип работы

95. Оценка безотказной работы технической аппаратуры (задачи)

96. Принцип работы и назначение телескопа

Чайник со свистком из нержавеющей стали "Mayer & Boch", 2,5 л.
Чайник со свистком металлический. Материал: нержавеющая сталь, бакелит, литое дно. Объем: 2,5 литра. Чайник выполнен из высококачественной
400 руб
Раздел: Чайники из нержавеющей стали
Ручка-стилус шариковая сувенирная "Максим".
Перед Вами готовый подарок в стильной упаковке — шариковая ручка со стилусом. Она имеет прочный металлический корпус, а именная надпись
415 руб
Раздел: Металлические ручки
Коляска-трость Everflo "Simple blue".
Коляска-трость - идеальный вариант для путешествий и поездок в общественном транспорте. Характеристики: - Стальная рама. - Одно положение
1300 руб
Раздел: Коляски-трость

97. Клеточная инженерия

98. Роль микроэлементов в обменных процессах растений и на накоплении ими биологически активных веществ (Реферат (обзор литературы) () WinWord 97)

99. Отчёт по лабараторным работам по биологии за 1 семестр


Поиск Рефератов на сайте za4eti.ru Вы студент, и у Вас нет времени на выполнение письменных работ (рефератов, курсовых и дипломов)? Мы сможем Вам в этом помочь. Возможно, Вам подойдет что-то из ПЕРЕЧНЯ ПРЕДМЕТОВ И ДИСЦИПЛИН, ПО КОТОРЫМ ВЫПОЛНЯЮТСЯ РЕФЕРАТЫ, КУРСОВЫЕ И ДИПЛОМНЫЕ РАБОТЫ. 
Вы можете поискать нужную Вам работу в КОЛЛЕКЦИИ ГОТОВЫХ РЕФЕРАТОВ, КУРСОВЫХ И ДИПЛОМНЫХ РАБОТ, выполненных преподавателями московских ВУЗов за период более чем 10-летней работы. Эти работы Вы можете бесплатно СКАЧАТЬ.