Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
сделать стартовой добавить в избранное
Кефирный гриб на сайте za4eti.ru

Биология Биология

Рекомбинантные вакцины (Генная инженерия)

Гуашь "Классика", 12 цветов.
Гуашевые краски изготавливаются на основе натуральных компонентов и высококачестсвенных пигментов с добавлением консервантов, не
170 руб
Раздел: 7 и более цветов
Пакеты с замком "Extra зиплок" (гриппер), комплект 100 штук (150x200 мм).
Быстрозакрывающиеся пакеты с замком "зиплок" предназначены для упаковки мелких предметов, фотографий, медицинских препаратов и
148 руб
Раздел: Гермоупаковка
Совок большой.
Длина 21,5 см. Расцветка в ассортименте, без возможности выбора.
21 руб
Раздел: Совки

ОГЛАВЛЕНИЕ Введение .3 Принципы конструирования рекомбинантных противовирусных вакцин .4-24 Получение соответствующего фрагмента нуклеиновой кислоты . .4 Выбор высокоактивной и хорошо изученной в иммунологическом отно- шении модели вектора-носителя и клонирование соответствующего гена 9-21 Получение рекомбинантных ДНК 9 Получение рекомбинантных РНК .11 Стратегия клонирования генов . 13 Разнообразие векторных молекул 17 Выбор системы экспрессии клонированного гена, способной обеспечить максимальный выход и функциональную полноценность продукта .22 Создание достаточно удобных и по возможности универсальных векторов для целевой доставки генов в клетки и ткани организма 23 Вакцина против лейкемии кошек, изготовленная с помощью генной инженерии . 24 Список литературы .26 ВВЕДЕНИЕ Существующие традиционные вакцины, несмотря на очевидный положительный эффект их широкого применения, обладают рядом недостатков. К ним относятся: наличие нежелательных биологически активных и балластных компонентов в препаратах, неполноценные иммунологические свойства самих антигенов. Кроме того, существуют заболевания, не вызывающие иммунитета, вакцины против которых вообще отсутствуют и не могут быть сконструированы на основе классических принципов. Все это вызывает необходимость усовершенствования уже существующих вакцин и создания принципиально новых типов вакцин. Одним из наиболее перспективных направлений в данной области является получение вакцинных препаратов на основе методов генной инженерии. Последним достижением генной инженерии и биотехнологии стало создание рекомбинантных противовирусных вакцин, содержащих гибридные молекулы нуклеиновых кислот. Данные вакцины обладают целым рядом преимуществ. Они характеризуются отсутствием (или значительным снижением) балластных компонентов, полной безвредностью, низкой стоимостью, которая связана с удешевлением промышленного производства вакцин. Экспрессируемый в клетках вакцинированного животного белок имеет конформацию, близкую к нативной, и обладает высокой антигенной активностью. Таким образом, рекомбинантные противовирусные вакцины являются новейшим поколением вакцин. Их очевидное преимущество обуславливает широкое применение данного типа вакцин в медицине и ветеринарии для вакцинации населения и сельскохозяйственных животных. 1. ПРИНЦИПЫ КОНСТРУИРОВАНИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ПРОТИВОВИРУСНЫХ ВАКЦИН Важным условием получения эффективного вакцинного препарата является соблюдение основных принципов его производства. Конструирование рекомбинантных противовирусных вакцин предполагает: 1) получение соответствующего фрагмента нуклеиновой кислоты; 2) выбор высокоактивной и хорошо изученной в иммунологическом отношении модели вектора-носителя и клонирование соответствующего гена (или генов); 3) выбор системы экспрессии клонированного гена, способной обеспечить максимальный выход и функциональную полноценность продукта; 4) создание достаточно удобных и по возможности универсальных векторов для целевой доставки генов в клетки и ткани организма. 1.1. ПОЛУЧЕНИЕ СООТВЕТСТВУЮЩЕГО ФРАГМЕНТА НУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ Для конструирования рекомбинантных РНК или ДНК необходимо получить фрагмент нуклеиновой кислоты, который в дальнейшем и будет встраиваться в векторную молекулу.

Фрагменты ДНК для встраивания в вектор можно получить непосредственно из хромосомной ДНК, расщепив ее рестриктазами или разрушив случайным образом (например, с помощью ультразвука) на сегменты с примерно одинаковой длиной. Выделение генов с помощью &quo ;вырезания&quo ; из генома, как правило, состоит из четырех этапов: 1) получение клонотеки фрагментов генома; 2) выявление фрагментов генома, содержащих необходимый ген, и точная локализация гена в данном фрагменте; 3) вырезание гена из фрагмента(ов) с помощью рестриктаз и сшивка участков гена с помощью ДНК-лигазы фага Т4, если эти участки получены из различных фрагментов; 4) амплификация гена в составе векторной молекулы. Указанный способ получения генов является наиболее приемлимым применительно к протозойным возбудителям, бактериям и для некоторых сложно устроенных ДНК-содержащих вирусов. Такие операции проводятся, в частности, при создании так называемых &quo ;библиотек генов&quo ;, то есть набора одинаковых векторных систем, в совокупности несущих в себе весь геном данного организма. Однако этот подход имеет ряд существенных недостатков. Во-первых, очень сложна задача подбора рестриктаз, позволяющих вырезать из геномной ДНК или клонированного фрагмента генома цельный ген. Как правило, вместе с геном остаются фланкирующие его лишние нуклеотидные последовательности, что мешает дальнейшему использованию этого гена, или же рестриктазы отрезают часть гена, делая его функционально неполноценным. Во-вторых, создание клонотеки генома возбудителя представляет специальную задачу и требует больших затрат времени. Наконец, для ряда ДНК-содержащих вирусов (паповавирусы) доказан сплайсированный характер структуры генов. Вполне понятно, что выделенные гены этих вирусов вследствие наличия интронных областей не будут проявлять функциональной активности в бактериальных клетках и окажутся непригодными при решении задач по конструированию рекомбинантных противовирусных вакцин. В-третьих, если ген составляет незначительную долю от всей геномной ДНК, то возникают большие трудности с его изоляцией и идентификацией. Наиболее распространенным является путь получения генов через синтез ДНК-копий (кДНК) информационных или каких-либо других (в оптимальном случае - индивидуальных) РНК путем их обратной транскрипции. Данный способ включает в себя три этапа: 1) выделение высокоочищенных мРНК, кодирующих индивидуальные структурные белки, либо выделение геномных РНК вирусов; 2) синтез двухцепочечной ДНК (гена) на матрицах РНК; 3) амплификация гена с помощью методов молекулярного клонирования. Как отмечалось, первым этапом в получении генов с помощью методов обратной транскрипции служит выделение и очистка геномных РНК и мРНК. Геномные РНК выделяют главным образом из очищенных вирионов, а мРНК - из инфицированных клеток. Для выделения мРНК из инфицированных клеток используют различные способы. В одном из вариантов выделение мРНК из инфицированных клеток проводят непосредственно из лизированных клеток (лизис осуществляют в денатурирующих средах в целях предотвращения разрушающего действия нуклеаз на мРНК) с последующей экстракцией фенолом и хлороформом или центрифигурированием лизата через подушку 5,7M СsCl (для освобождения от клеточных ДНК) и заключительной аффинной хроматографией на олиго(dТ)-целлюлозе (поли(У)-сефарозе).

Выделение мРНК можно проводить и из очищенных полирибосом инфицированных клеток. В случае необходимости получения специфических мРНК, ко­дирующих индивидуальные структурные белки возбудителя, исполь­зуют следующий способ. Инфицированные вирусом клетки разрушают механическим путем или химическими методами (использование неионных детергентов). Клеточный лизат освобождают от ядер и митохондрий методом диф­ференциального центрифугирования и подвергают хроматографии на антительном сорбенте. При этой процедуре с антителами, специ­фичными к определенному структурному белку возбудителя, связы­ваются полисомы, осуществляющие синтез этого белка. Также может быть использован метод непрямой иммунопреципитации полисом, при котором комплекс антитело - полисома преципитируется из раствора добав­лением второго антитела, специфичного к первому. В качестве второ­го антитела чаще всего берут фиксированные формалином клетки S aphilococcus aureus, на поверхности которых находится так назы­ваемый белок А, имеющий сродство к Fc-фрагментам Ig. Из полисом, полученных одним из описанных способов, далее уже выделяют мРНК. Другой путь выделения индивидуальных мРНК базируется на свойстве мРНК взаимо­действовать с комплементарными ДНК, связанными с твердым носи­телем (целлюлоза, сефароза, нитроцеллюлозные фильтры). Этот ме­тод отбора и очистки специфических мРНК является самым эффективным. Однако его применение возможно только при наличии соответст­вующих комплементарных ДНК. Получение препарата очищенной мРНК позволяет перейти к ра­ботам по синтезу гена с помощью обратной транскрипции, которую осуществляют с помощью ревертазы AMV в специально подобран­ных условиях. В процессе обратной транскрипции матрицей служит мРНК, а затравкой олиго(d 12-18) (для мРНК, имеющих поли(А)-тракт) или химически синтезированный олигонуклеотид, комплемен­тарный 3'-концу мРНК. После синтеза на мРНК компле­ментарной цепи ДНК и разрушения РНК (чаще используется обра­ботка щелочью) осуществляют синтез второй цепи ДНК. В этой реакции матрицей служит первая цепь ДНК. Реакция может катали­зироваться как ревертазой, так и ДНК-полимеразой. После получения двухцепочечной кДНК следует стадия получения гена, заключающаяся в гидролизе одноцепочечного участка ДНК, соединяющего первую и вторую цепи, нуклеазой S1. Для получения необходимых участков РНК используют две группы способов: 1) расщепление полирибонуклеотидной цепи РНК в заданном месте; 2) синтез РНК (ферментативный на ДНК- или РНК-матрицах и химический). Расщепление полирибонуклеотидной цепи РНК может осуществляться в присутствии различных ферментов. Для этой цели используют ферменты: рибонуклеазу H, нуклеазы, ковалентно связанные с олигонуклеотидами (например, стафилококковая нуклеаза), рибозимы (например, рибозим L-19). Исторически первым способом направленной ферментативной фрагментации РНК (называемой также адресованной, сайт-направленной или сайт-специфической фрагментацией РНК) является разработанный в Московском университете метод гидролиза РНК ферментом РНКазой H в присутствии комплементарных олигодезоксирибонуклеотидов.

Идеи Дарвина и Менделя дали толчок бурному развитию биотехнологий. В 1870-1890-х годах начинается массовое создание гибридов сельскохозяйственных растений, что позволило создать тысячи новых сортов. 1900 год — впервые для генетических исследований начали применять мушек дрозофил.1902 год — появление термина «иммунология», 1906 год — появление термина «генетика». 1911 год — открытие вируса. 1919 год — впервые использован термин «биотехнология», 1920 год — открыты гормоны. 1928 год — английский ученый Александр Флеминг открыл пенициллин. 1938 год — появление термина «молекулярная биология». 1941 год — датский микробиолог Лост прочитал лекцию в городе Львове (тогда входил в состав Польши) и впервые использовал термин «генетическая инженерия». 1942 год — начало массового производства антибиотиков (пенициллин), 1944 год — открытие ДНК. 1953 год — начало современной эпохи в генетике. Американские ученые Джеймс Ватсон и Фрэнсис Крик открыли двойную спираль ДНК. 1961 год — создан первый биопестицид. 1964 год — начало «Зеленой революции»: Международный Институт исследований риса на Филиппинах добился повышения урожайности риса вдвое, что позволило избавиться от голода во многих странах Азии. 1966 год — впервые получено представление о генетическом коде человека. 1969 год — впервые синтезирован фермент. 1971 год — первый успешный синтез гена. 1962 год — доказано, что генокод человека на 99% аналогичен генокоду горилл и шимпанзе. 1975 год — первые попытки государственного регулирования экспериментов в области генной инженерии. 1978 год — впервые создан рекомбинантный инсулин, который практически полностью идентичен естественному

1. Новейшие методы селекции: клеточная инженерия, генная инженерия, хромосомная инженерия

2. Достижения генной инженерии и биотехнологии

3. Генная инженерия

4. Генная инженерия

5. Достижения генной инженерии и биотехнологии

6. Отрасли применения генной инженерии
7. Генная инженерия
8. Медицинская биотехнология и генная инженерия. Микробиологические основы антимикробной профилактики и терапии

9. Вакцины

10. Вакцины, их получения из микроэлементов

11. Ответственность по вакцинам и их безопасность

12. Вакцины

13. Повышение иммунного ответа на вакцины и снижение поствакцинальной реакции с использованием препарата Фоспренил

14. Сочетанное введение детских вакцин: важное направление в по-литике здравоохранения

15. Биотехнология вакцин и сывороток

16. Вакцины

Чудо трусики для плавания, от 0 до 3-х лет, трехслойные, арт. 111, для мальчиков.
Детские специальные трусики для плавания в бассейне и открытом водоеме. Плотно прилегают, отлично защищают! Изготовлены из хлопка, имеют
376 руб
Раздел: Многоразовые
Простыня на резинке "ЭГО", 160х200 см, салатовая.
Трикотажная простыня "ЭГО" на резинке выполнена из 100% хлопка высокого качества. Натуральный, экологически чистый материал
760 руб
Раздел: Простыни, пододеяльники
Перчатки виниловые одноразовые, размер L, 100 шт.
Виниловые одноразовые перчатки применяются во время разных видов работ: в пищевой сфере, косметологии, при уборке. Перчатки мягкие и
305 руб
Раздел: Перчатки

17. Імунітет та вакцини проти пухлин

18. Новые и сверхновые звезды (Доклад)

19. Генетическая инженерия

20. Клонирование и анализ генов легких цепей иммуноглобулинов стерляди

21. Подсолнечник (Доклад)

22. Генетический анализ при взаимодействии генов
23. Мерзлотные явления в земной коре (кpиолитология) (. Иpкутская область. Доклад)
24. Особенности озёр России (Доклад)

25. Греция (Доклад)

26. Коста-Рика (Доклад)

27. Озеро Байкал (Доклад)

28. Саудовская Аравия (Доклад)

29. Таиланд (Доклад)

30. Урбанизация и заселенность территории (Доклад)

31. Экономическое развитие Западносибирского региона (Доклад)

32. Понятие государственного бюджета (Доклад)

Подушка "Нордтекс. Цветочный заяц", 40х40 см.
Декоративные подушки являются непременным элементом современного интерьера. Они могут послужить прекрасным украшением не только спальни,
454 руб
Раздел: Подушки
Фиксатор головы ребенка для автокресла "Совы".
Клювонос надежно поддерживает голову ребенка во время сна в автокресле и не сползает со лба ребенка на лицо и шею, так как система
730 руб
Раздел: Удерживающие устройства
Карандаши цветные "Artberry", 24 цвета.
Шестигранные цветные карандаши с толщиной грифеля 3 мм, толщина самого карандаша 7 мм. Увеличенное количество цветовых пигментов для еще
321 руб
Раздел: 13-24 цвета

33. Мусульманское право (Доклад)

34. Доклад: Страны мира во второй половине XX века. Франция.

35. Типы государства (Доклад)

36. Александр Трифонович Твардовский (Доклад)

37. Устные высказывания и их особенности (беседа, лекция, доклад, диспут, дискуссия)

38. Биография Джеральда Даррелла (Доклад)
39. Иван Сергеевич Тургенев. Жизнь и творчество (Доклад)
40. Национально-освободительная война сирийского и ливанских народов в 1919-1927 гг. (Доклад)

41. Ярлыки ордынских ханов русским митрополитам (Доклад)

42. Московский Кремль (Доклад)

43. Кибернетика (Доклад)

44. Хромосомные болезни (Доклад)

45. Дознание. Его виды (Доклад)

46. Изучение и разработка очистки стоков от ионов тяжелых металлов (Доклад)

47. Чернобыльская авария (Доклад)

48. Учебно-воспитательная деятельность учителя. Личностные качества учителя (Доклад)

Термо ланч-бокс "Bento" (арт. TK 0049).
Термо ланч-бокс "Бенто" предназначен для тех, кто ценит комфорт при обеде, но не обладает большим количеством времени. Быстро
617 руб
Раздел: Штучно
Зеркальце карманное "Котик", 8x7 см.
Симпатичное карманное зеркало станет Вашим незаменимым помощником и с легкостью разместится даже в небольшой женской сумочке или кармане.
354 руб
Раздел: Зеркала, расчески, заколки
Коробка подарочная "Цветы и павлиньи перья".
Коробка подарочная. Материал: мелованный, ламинированный, негофрированный картон плотностью 1100 г/м2. Отделка: полноцветный декоративный
302 руб
Раздел: Коробки

49. Процесс становление власти в России (Доклад)

50. Ангола после обретения независимости (Доклад)

51. Гана до обретения независимости (Доклад)

52. Гражданское общество и либерализм (Доклад)

53. Инженерный труд России. Повышение квалификации инженера

54. Анализ психологической деятельности военного инженера
55. Эниология как паранаука (Доклад)
56. Картофель (как важная кормовая и техническая культура) (Доклад)

57. Социально-психологический тренинг (Доклад)

58. Т.Парсонс: Аналитический реализм и понимание задач социологической теории (Доклад)

59. Роль социологических знаний в образовании и деятельности инженера

60. Устройство глаза человека (Доклад) (WinWord 98)

61. Разработать оптимальное рабочее место инженера-программиста, расчет освещенности, расчет информационной нагрузки

62. Дианетика современная наука душевного здоровья (Доклад)

63. Немецкая классическая философия (Доклад)

64. Жизнь и деятельность Роберта Милликена (Доклад)

Умные кубики. Контуры. 50 игр для развития интеллекта.
IQ-кубики "Контуры" - универсальный набор интеллектуальных игр для дошкольников. IQ-кубики помогают развивать моторную и
306 руб
Раздел: Развивающие игры с кубиками
Тетрадь на резинке "Elements", В5, 120 листов, клетка, синяя.
Тетрадь общая на резинке. Формат: В5. Количество листов: 120 в клетку. Бумага: офсет. Цвет обложки: синий.
401 руб
Раздел: Прочие
Горка детская большая (2 м).
Горка предназначена для игры на свежем воздухе или в игровой комнате. Есть возможность подключить воду. Игрушка выполнена из качественного
8450 руб
Раздел: Горки

65. Материализм в учении древнегреческих атомистов (Доклад)

66. "Камю", "Сартр", "Шопенгауэр", "Ясперс", "Фромм" (Рефераты, доклады по философии)

67. Значение ученого, инженера в обществе. Проблема ответственности

68. Крахмал (Доклад)

69. Нефть (Доклад)

70. Российская банковская система после Октябрьской революции 1917г. (Доклад)
71. Дилинг в современных российских условиях (Доклад)
72. Фьючерсные операции товарных бирж в России (Доклад)

73. Порядок исчисления и уплаты в бюджет налога на имущество предприятий (Доклад)

74. Появление денег (Доклад)

75. Адам Смит (Доклад)

76. Кейнс и кейнсианство (Доклад)

77. Использование маркетингового подхода при выживании ВУЗов в современных условиях (Доклад)

78. Анализ макроэкономических показателей США (Доклад)

79. Подходы к поэтапному формированию платежного союза (Доклад)

80. ЭКЮ - (European Currency Unit) (Доклад)

Увлекательная настольная игра "Делиссимо", новая версия.
В этой милой игре вам предстоит немало потрудиться, так как вы работаете на известную и уважаемую итальянскую пиццерию «Делиссимо». Её
632 руб
Раздел: Карточные игры
Крышка силиконовая универсальная, 31 см.
Универсальная силиконовая крышка изготовлена из высококачественного пищевого силикона — экологичного и долговечного материала. Не теряет
318 руб
Раздел: Крышки
Форма разъемная для кулича Regent "Easy" круглая, 16x12,5 см.
Форма для выпечки разъемная из алюминия с антипригарным покрытием. Удобная застежка. Поверхность устойчива к царапинам. Размер: 16x12,5 см.
581 руб
Раздел: Формы и формочки для выпечки

81. Секретарь (Доклад)

82. Анализ альтернатив и выбор стратегии (Доклад)

83. Предпринимательские потребности (Доклад)

84. Монополии (Доклад)

85. Доклад на защите дипломной работы "Анализ финансового состояния рассмотрен на примере лечебно-профилактического учреждения - санаторий им. Лермонтова"

86. Анализ мирового финансового кризиса /октябрь-ноябрь 1997г./ (Доклад)
87. Политика эффективности занятости в России (Доклад)
88. Теоретический аспект инфляции (Доклад)

89. Кризис конца 98 - экономико-политические аспекты (Доклад)

90. Нобелевские лауреаты по экономике (на 23 человека) (Доклад)

91. Концепция "социальной инженерии" А.К.Гастева

92. Курс лекций по истории Отечества - основа для докладов и выступлений

93. "Она писала в духе горных инженеров..." (газета "Екатеринбургская неделя")

94. Философствующие инженеры и первые философы техники

95. Инженерия знаний

96. Інженерний геній Риму

Шкатулка "Фермерский шик" - В (25,5x18,5x11 см).
Короб шкатулки выполнен из ткани. Ручка из бусин. Внутри пластиковый поддон с разделителями. Шкатулка очень удобна в использовании, и к
492 руб
Раздел: Шкатулки для рукоделия
Фоторамка "Poster black".
Рамка может располагаться как вертикально, так и горизонтально. Экран у рамки пластиковый. Для фотографий размером: 30х40см. Материал рамки: пластик.
332 руб
Раздел: Размер 30x40
Светильник "Плазма №5".
Размеры светильника: 22х11х11.5 см. Диаметр лампы: 11 см. Плазменный светильник в виде шара на подставке, при включении создаёт внутри
1191 руб
Раздел: Необычные светильники

97. Сообщение-доклад по произведению И.С. Тургенева "Накануне"

98. Допинги и генная терапия

99. Мозг гения


Поиск Рефератов на сайте za4eti.ru Вы студент, и у Вас нет времени на выполнение письменных работ (рефератов, курсовых и дипломов)? Мы сможем Вам в этом помочь. Возможно, Вам подойдет что-то из ПЕРЕЧНЯ ПРЕДМЕТОВ И ДИСЦИПЛИН, ПО КОТОРЫМ ВЫПОЛНЯЮТСЯ РЕФЕРАТЫ, КУРСОВЫЕ И ДИПЛОМНЫЕ РАБОТЫ. 
Вы можете поискать нужную Вам работу в КОЛЛЕКЦИИ ГОТОВЫХ РЕФЕРАТОВ, КУРСОВЫХ И ДИПЛОМНЫХ РАБОТ, выполненных преподавателями московских ВУЗов за период более чем 10-летней работы. Эти работы Вы можете бесплатно СКАЧАТЬ.